Um método de coverglass com câmara para formação in vitro de biofilmes bacterianos

0 visualizações • 2:34 min. • February 26th, 2026

Pegue uma cultura de bactérias formadoras de biofilmes cultivadas em meios ricos em nutrientes.

Dilua a cultura em meio fresco e incube com agitação para promover o crescimento bacteriano até que a concentração desejada seja atingida.

Em seguida, adicione a cultura a um substrato fresco enriquecido com filtrados de escarro derivados de fibrose cística.

Esses filtrados contêm fatores derivados do hospedeiro que preparam as bactérias para a formação de biofilmes.

Dispense a suspensão preparada nos poços de um copo de cobertura com câmara e incube estaticamente para permitir que as bactérias se fixem na superfície do vidro.

Após a incubação, remova o substrato e enxágue suavemente os poços com substrato fresco para eliminar bactérias não aderentes.

Adicione meios frescos contendo filtrado de escarro nos poços e novamente incube a câmara de forma estática.

Durante a incubação, fatores derivados do hospedeiro no meio ativam vias de sinalização bacteriana que desencadeiam a produção de matriz extracelular e promovem o desenvolvimento estruturado de biofilmes.

O biofilme está agora pronto para análise adicional.

Coloque 40 microlitros de cultura previamente preparada em 4 mililitros de caldo Luria

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Filtrado de escarro