Modelagem de Infecção Intestinal em Larvas de Peixe-Zebra usando Bactérias Transmitidas por Alimentos

Comece com uma placa multipoço contendo paramecia pré-infectada com proteínas fluorescentes patogênicas que expressam E. coli.

Adicione larvas de peixe-zebra anestesiadas e co-incube-as sob condições diurnas para imitar o ambiente natural de alimentação.

Durante a incubação, as larvas recuperam a consciência e se alimentam de paramecia infectada.

Uma vez ingeridas, as paramecias são digeridas, liberando E. coli no trato intestinal.

A colonização bacteriana progride do intestino anterior para o intestino posterior, imitando uma infecção transmitida por alimentos.

Em seguida, lave as larvas em um meio suplementado com um agente anestésico para reanestesiá-las.

Depois, coloque as larvas em agarose de baixo ponto de fusão dentro de uma placa de imagem fluorescente.

Usando um estereomicroscópio, alinhe o peixe-zebra e incube para permitir que a agarose solidifique.

Sobreponha um meio rico em nutrientes suplementado com um agente anestésico.

Usando um microscópio de fluorescência, observe as larvas para a distribuição de E. coli fluorescente para avaliar a progressão da infecção bacteriana

Para infecção alimentar do peixe-zebra, dilua as amostras de paramecia para dois vezes dez até cinco parameci