Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:03 min. • March 31st, 2026
Comece com um reator eletroquímico equipado com uma jaqueta d'água externa, firmemente vedada sobre um eletrodo de trabalho.
Em seguida, insira os eletrodos de referência e contra-eletrodos para completar o circuito elétrico.
Remova o eletrodo de referência, adicione o meio nutritivo e coloque o eletrodo de volta.
Introduza gás nitrogênio filtrado para criar condições anaeróbicas.
Coloque o sistema dentro de uma gaiola de Faraday para evitar interferências elétricas externas.
Conecte o sistema de circulação de água para manter a temperatura do reator durante a aplicação de tensão.
Em seguida, conecte-se a um potencióstato e aplique uma tensão elétrica constante ao eletrodo de trabalho em relação ao eletrodo de referência.
Injete a suspensão bacteriana no reator e feche a gaiola. Continue aplicando voltagem elétrica.
A voltagem aplicada estimula a transferência extracelular de elétrons das células bacterianas para o eletrodo de trabalho, promovendo a fixação inicial na superfície.
Com o tempo, as bactérias formam um biofilme monocamada no eletrodo de trabalho.
Para construir um reator eletroquímico de três eletrodos, coloque um substrato ITO como eletrodo de trabalho na parte inferior do reator.
Em seguida, insira um cilindro de vidro e uma cobertura de politetrafluoroetileno e insira um fio de platina como contraeletrodo. Depois, insira um eletrodo de cloreto de prata no reator como eletrodo de referência. Em seguida, adicione quatro mililitros de DM suplementados com 10 milimolares de lactato e 0,5 gramas por litro de extrato de levedura no reator eletroquímico.
Após confirmar que não há vazamento do reator eletroquímico, o gás nitrogênio para dentro do reator eletroquímico ao longo de 20 minutos para manter condições anaeróbias dentro do reator eletroquímico. Conecte o reator eletroquímico a um potenciostado e aplique um positivo de 0,4 volts ao eletrodo ITO, mantendo a temperatura do reator eletroquímico em 30 graus Celsius usando um sistema externo de circulação de água.
Adicione 0,3 mililitros da suspensão da célula no reator eletroquímico através da porta de injeção usando uma seringa. O OD600 no reator muda para 0,1. Continue a aplicação potencial a 0,4 volts positivo no eletrodo ITO por 25 horas.