Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:59 min. • March 31st, 2026
Comece com poços de microplacas contendo biofilmes de uma bactéria patogênica, divididos em quatro grupos experimentais.
Aspire suavemente o meio e enxágue com um tampão para remover células não aderentes.
Adicione um buffer contendo um precursor do fotosensimizador em dois grupos, enquanto os dois restantes recebem apenas o buffer.
Incube todos os grupos no escuro para permitir que o precursor difunda através do biofilme, entre nas células bacterianas e seja metabolizado em um fotosensimizador que se acumula no citoplasma e nas membranas.
Após a incubação, expõe um grupo tratado com precursor e um grupo apenas tampão à irradiação luminosa.
No grupo tratado por precursores, a luz excita o fotossensibilizador, que transfere energia para o oxigênio molecular e gera espécies reativas de oxigênio (ROS).
Os ROS desintegram membranas, degradam proteínas e fragmentam DNA, resultando na morte celular bacteriana.
As outras três condições não produzem ROS, pois o precursor ou a luz estão ausentes, deixando o biofilme inalterado.
Para gerar um biofilme em uma placa de 96 poços, primeiro inocule um a menos 80 graus Celsius descongelou Staphylococcus aureus USA trezentos em três biofilmes, formando cul
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