Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:15 min. • March 31st, 2026
Comece com uma lâmina de vidro grande e lâminas menores colocadas em cada borda em uma camada dupla.
Despeje agarose derretida no espaço e cubra com outra lâmina grande de vidro.
Resfrie a configuração para solidificar a agarose.
Remova os slides de vidro e corte a agarose em pequenas almofadas.
Coloque as almofadas de agarose dentro de uma moldura adesiva presa a um ferrolho.
Pegue uma cultura de bactérias patogênicas, geneticamente modificadas para expressar um sistema de secreção marcado fluorescente, essencial para a infecção do hospedeiro.
Use uma mancha bacteriana densa e suspenda-a em água.
Vórtice para dispersar as bactérias uniformemente.
Aplique a suspensão na almofada de agarose para imobilizar as bactérias.
Fele com uma capa de cobertura para manter a hidratação.
Sob iluminação de campo claro, selecione um campo de células para imagem.
Otimize as configurações do microscópio para reduzir o fotodescolorimento e aumentar a sensibilidade ao sinal.
Mude para o canal de fluorescência para detectar as bactérias marcadas com fluorescência.
Comece fazendo almofadas de agarose para imagens de células vivas. Prepare cerca de 30 mililitros de solução de agarose de baixa fusão a 1% em água e aq
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