Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:48 min. • March 31st, 2026
Comece com M, marcado com fluoróforos vermelhos. antígenos de tuberculose imobilizados em uma capa revestida de polímero.
Adicione um buffer de bloqueio para bloquear os sítios de ligação não específicos. Lave para remover o excesso de bloqueador.
Introduza proteína total extraída de macrófagos humanos, incluindo o receptor da superfície celular de interesse. Incubar.
Os receptores de macrófagos se ligam aos antígenos bacterianos imobilizados.
Adicione um reticulador para estabilizar os complexos receptor–antígeno, seguido de um apagador para neutralizar os reticuladores não reagidos.
Lave e adicione um segundo reticulador para reforçar os complexos.
Lave de novo. Depois, remova o coverslip e inverta-o sobre uma solução primária de anticorpos.
Os anticorpos se ligam ao receptor de macrófagos de interesse.
Lave e inverta o coverslip sobre uma solução secundária verde conjugada com fluoróforo, que se liga aos anticorpos primários.
Lave e monte o revestimento.
Visualize a amostra sob um microscópio de fluorescência. Sinais vermelhos e verdes co-localizados confirmam a interação entre o receptor de macrófagos e o antígeno bacteriano.
Usando pinças cirúrgicas de bico arredondado, coloque lâminas d
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos