Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:03 min. • March 31st, 2026
Pegue uma cultura bacteriana capaz de infectar tecido foliar.
Raspe as colônias e suspenda em uma solução salina.
Meça a densidade óptica para avaliar a concentração bacteriana e depois dilua até o OD desejado.
Realize diluições seriadas para atingir a concentração final do inoculo.
Adicione um surfactante para reduzir a tensão superficial e garantir a propagação uniforme das bactérias na folha.
Transfira a suspensão para uma placa de Petri.
Em seguida, coloque dois gravetos de madeira sobre o topo de um pote de Arabidopsis .
Inverta a planta sobre o prato, imergindo as folhas na suspensão.
Coloque a instalação em uma câmara de vácuo e aplique um pulso de vácuo
O vácuo aplicado remove o ar do tecido foliar por aberturas naturais.
Liberar o vácuo restaura a pressão atmosférica, forçando bactérias a entrarem nas folhas.
Repita os pulsos para alcançar a máxima infiltração.
Tire o pote. Depois, enxugue o excesso de inóculo.
As folhas infectadas por bactérias de Arabidopsis estão prontas para análise a jusante.
Estenda o estoque de glicerol da cepa de interesse de Pseudomonas syringae de menos 80 graus Celsius em uma placa LB suplementada com os antibióticos apropriados. Incube a placa a 28 graus Cel
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