Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:44 min. • March 31st, 2026
Comece com um inserto Transwell contendo uma cocultura de células epiteliais e semelhantes a um cálice.
As células epiteliais formam junções apertadas, enquanto células semelhantes a cálices produzem muco, replicando a barreira epitelial intestinal in vivo.
Faça uma suspensão da comunidade bacteriana oral que foi tratada com fluido intestinal simulado para simular a digestão do intestino delgado.
Substitua o meio na câmara superior pela suspensão bacteriana.
Incube com sacudição para facilitar a adesão bacteriana e internalização.
Colete o meio da câmara superior contendo bactérias não aderentes para ensaios de viabilidade subsequentes.
Adicione uma solução dissolvente do muco e incube para solubilizar o muco e liberar as bactérias aderidas.
Colete a solução para análise adicional da viabilidade e adesão bacteriana.
Lave as células com tampão e adicione um detergente para deslocá-las.
Recolha a suspensão da cela.
Faça vórtice na suspensão para lisar as células e liberar as bactérias internalizadas.
Centrifugar e coletar separadamente os detritos sobrenadantes e celulares para análise posterior.
Após lavar e ajustar a densidade celular da digestão do intestino delgado conforme o protocolo de te
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