Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:24 min. • August 31st, 2026
Retire tubos contendo capsídeos virais, que são partículas semelhantes a vírus sem material genético.
Aqueça os tubos a uma temperatura constante por durações variadas.
Uma duração menor de aquecimento estressa levemente as proteínas do capsídeo, enquanto o aquecimento prolongado rompe o capsídeo e causa agregação.
Resfrie rapidamente os tubos para evitar alterações estruturais adicionais.
Transfira o líquido para uma película de parafina.
Coloque uma grade de microscopia eletrônica de transmissão (TEM) sobre a gota. Os capsídeos aderem à superfície da grade.
Enxugue a grade com um papel-filtro para remover o excesso de fluido.
Lave com um tampão para remover os capsídeos fracamente ligados, em seguida, seque a grade novamente.
Mergulhe no acetato de uranila, um corante de metal pesado que se liga à superfície do capsídeo, fazendo com que eles apareçam mais escuros ao microscópio eletrônico de transmissão (TEM).
Enxugue a grade e coloque-a sobre uma placa. Armazene a placa em um dessecador para remover a umidade.
Image o grade usando MET para visualizar os danos no capsídeo induzidos pelo calor.
Realize o tratamento térmico como anteriormente, substituindo o PBS por HEPES 10 milimolar, pH 7,4
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