Purificação de Vírus do Fluido Alantoide de Ovos de Galinha Embrionados

Inicie com um reservatório contendo fluido alantoico coletado de ovos de galinha infectados com o vírus.

Este fluido contém partículas virais juntamente com contaminantes derivados do hospedeiro.

Passe o fluido por um filtro de profundidade para capturar contaminantes grandes, permitindo que contaminantes menores e vírus passem através.

Em seguida, carregue o fluido filtrado em um sistema de filtração, onde ele flui tangencialmente sobre uma superfície de membrana.

Contaminantes menores passam através da membrana, enquanto o vírus é retido e concentrado.

Carregue o vírus concentrado em um gradiente de densidade e centrifugue-o. O vírus forma uma banda distinta onde sua densidade corresponde à do gradiente.

Colete a faixa rica em vírus em uma cassete de diálise e coloque-a em um tampão. Os componentes do gradiente difundem-se para fora, enquanto a água do tampão difunde-se para dentro através da membrana semipermeável.

Em seguida, coloque a cassete em uma solução hipertônica para retirar a água e concentrar o vírus purificado.

Para a purificação do vírus da doença de Newcastle ou NDV, primeiramente, prepare o sistema experimental previamente montado passando 50 mililitros de PBS através del