Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:00 min. • August 31st, 2026
Inicie com uma placa de múltiplas cavidades contendo uma suspensão de fago diluída em série em caldo rico em nutrientes como tratamento e caldo sem fago como controle.
Adicione E. coli a cada poço. Usando um espectrofotômetro, meça a densidade óptica (DO) inicial para registrar a concentração bacteriana inicial.
Em seguida, incube a placa para permitir o crescimento bacteriano e a infecção por fago.
No controle, as bactérias utilizam nutrientes e proliferam, aumentando a DO.
No tratamento, os fagos se ligam aos receptores da superfície bacteriana e injetam seus genomas no citoplasma.
Utilizando a maquinaria da célula hospedeira, o genoma viral se replica e produz proteínas virais, que se montam em novas partículas virais. Essas partículas lisam a célula, liberando a prole.
Meça a DO em intervalos para comparar o crescimento bacteriano.
Os poços de controle mostram um aumento progressivo na DO, enquanto os poços tratados com fagos exibem valores de DO mais baixos, com reduções maiores em concentrações mais elevadas de fagos.
Isso ajuda a determinar a concentração de fago necessária para a máxima inibição do crescimento bacteriano.
Para começar, monte o ensaio em microplaca utilizando ponteir
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