Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:08 min. • August 31st, 2026
Inicie com um camundongo anestesiado posicionado em decúbito dorsal, com a pele do tórax depilada.
Desinfete a pele depilada.
Utilize a imagem de ultrassom para visualizar o coração e identificar a parede externa do ventrículo esquerdo.
Utilize uma microsseringa contendo um vírus recombinante que codifica um gene em teste suspeito de afetar a função cardíaca.
Sob orientação de ultrassom, insira a agulha na parede ventricular.
Injecte o vírus na camada muscular da parede.
Realize uma segunda e terceira injeção, visando diferentes sítios ventriculares para alcançar uma expressão gênica mais ampla.
Retire a agulha e permita que o camundongo se recupere.
O vírus liga-se a receptores nas células musculares ventriculares, iniciando a endocitose mediada por receptor e o transporte do genoma viral para o núcleo.
A expressão do genoma viral leva à síntese da proteína codificada.
O modelo de camundongo está agora pronto para avaliar os efeitos da expressão gênica induzida por vírus na função cardíaca.
Para começar, esterilize a região inferior esquerda do tórax do camundongo anestesiado com rodadas alternadas de uma solução à base de iodo ou clorexidina, em álcool, três vezes com movimento circular. Sob orientação de imagem por ultrassonografia, insira a agulha da seringa contendo o vírus no tórax do animal.
Posicione a ponta da agulha na parede anterior livre do ventrículo esquerdo e injete lentamente de 10 a 15 µL do vírus. Verifique a injeção bem-sucedida em imagens de ultrassom pela maior luminosidade próxima à ponta da agulha. Retire a agulha do coração e insira em outras regiões do ventrículo esquerdo para uma segunda e terceira injeção da mesma quantidade de vírus.