Entrega de Genes Virais no Coração de Camundongos para Avaliação dos Efeitos Gênicos na Função Cardíaca

Inicie com um camundongo anestesiado posicionado em decúbito dorsal, com a pele do tórax depilada.

Desinfete a pele depilada.

Utilize a imagem de ultrassom para visualizar o coração e identificar a parede externa do ventrículo esquerdo.

Utilize uma microsseringa contendo um vírus recombinante que codifica um gene em teste suspeito de afetar a função cardíaca.

Sob orientação de ultrassom, insira a agulha na parede ventricular.

Injecte o vírus na camada muscular da parede.

Realize uma segunda e terceira injeção, visando diferentes sítios ventriculares para alcançar uma expressão gênica mais ampla.

Retire a agulha e permita que o camundongo se recupere.

O vírus liga-se a receptores nas células musculares ventriculares, iniciando a endocitose mediada por receptor e o transporte do genoma viral para o núcleo.

A expressão do genoma viral leva à síntese da proteína codificada.

O modelo de camundongo está agora pronto para avaliar os efeitos da expressão gênica induzida por vírus na função cardíaca.

Para começar, esterilize a região inferior esquerda do tórax do camundongo anestesiado com rodadas alternadas de uma solução à base de iodo ou clorexidina, em álcool, três vezes com movimento circular. So