Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 2:08 min. • August 31st, 2026
Inicie com um sistema de biorreator contendo um esqueleto de fígado de rato descelularizado repovoado com células hepáticas humanas.
O esqueleto é mantido em um sistema de fluxo que circula o meio para fornecer nutrientes.
Carregue uma seringa com um tampão contendo um vetor de vírus adeno-associado recombinante.
O vetor carrega DNA auto-complementar com um cassete de transgênio que codifica um repórter fluorescente e um RNA de silenciamento gênico.
Interrompa o fluxo do meio e desconecte o tubo de entrada.
Injete o vetor através do vaso sanguíneo principal que supre o andamio.
Incubar para permitir a interação entre vetor e célula.
O vetor entra nas células hepáticas por endocitose mediada por receptor.
Uma vez no interior, o vetor escapa do endossomo e libera seu DNA auto-complementar no núcleo.
O DNA autocomplementar permite a expressão direta do transgene, produzindo uma proteína fluorescente e um RNA de silenciamento gênico.
Retome gradualmente o fluxo do meio para restabelecer a circulação pela estrutura.
O modelo de fígado transduzido está agora adequado para análises posteriores.
Agora, transduza o modelo de fígado. Primeiro, obtenha 27 trilhões de vetores em cinco mililitros de PBS ca
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