Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:39 min. • September 30th, 2026
Inicie com um tubo de ultracentrifugação contendo um gradiente de sacarose.
Adicione cuidadosamente o sobrenadante contendo o vírus na parte superior.
Centrifugue com aceleração e desaceleração controladas para preservar o gradiente, permitindo que as partículas sedimentem na camada correspondente à sua densidade de flutuação durante a centrifugação.
As proteínas mais leves permanecem na camada superior. Partículas virais intactas se concentram entre as camadas de menor e maior densidade, enquanto os detritos celulares mais pesados sedimentam no fundo.
Descarte as camadas superiores e colete as frações intermediárias de sacarose enriquecidas com vírus em um tubo novo.
Adicione o tampão e misture a amostra várias vezes.
Em seguida, camadeie cuidadosamente a suspensão viral sobre uma almofada de sacarose de baixa densidade em um tubo novo.
Centrifugue a suspensão. Partículas virais mais pesadas sedimentam no fundo, enquanto os contaminantes mais leves permanecem no sobrenadante.
Descarte o sobrenadante. Drene o líquido restante invertendo o tubo sobre uma toalha de papel.
Reconstitua o pellet viral no tampão.
A suspensão enriquecida com vírus está pronta para estudos posteriores.
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