Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 4:56 min. • September 30th, 2026
Utilize uma placa de múltiplos poços com soro de paciente inativado pelo calor contendo anticorpos específicos para coronavírus no poço de teste. Inclua soro humano saudável como controle.
Adicione pseudovírus que exibem proteínas spike de coronavírus e carreiam RNA codificador da proteína verde fluorescente às amostras de soro e incube.
No poço de teste, os anticorpos ligam-se às proteínas spike e neutralizam os pseudovírus, enquanto no poço controle, anticorpos inespecíficos não se ligam às proteínas spike, deixando os pseudovírus não ligados.
Adicione a mistura a monocamadas de células epiteliais. Incube para adsorção viral.
Adicione meio de sobreposição semissólido a cada poço para restringir a difusão viral. Incube.
No controle, os pseudovírus não ligados se ligam aos receptores celulares, entram nas células, liberam RNA e expressam GFP, formando focos de infecção fluorescentes.
No poço de teste, os pseudovírus neutralizados por anticorpos não conseguem entrar nas células, impedindo a formação de focos de infecção.
Sob um microscópio fluorescente, conte os focos de infecção fluorescentes.
A ausência de focos de infecção no poço de teste, comparada à presença de numerosos focos no cont
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