Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:42 min. • September 30th, 2026
Inicie com células epiteliais humanas semelhantes a epitélio.
O primeiro poço contém células não transfectadas, e o segundo poço contém células transfectadas com mimetizadores de microRNA.
Nas células transfectadas, uma fita mimética de microRNA se liga a um complexo proteico para formar um complexo de silenciamento induzido por RNA.
Remova o meio e adicione a suspensão viral.
Incubar para permitir a adesão viral.
Descarte o meio e adicione meio fresco, depois incube.
Em células não transfectadas, o vírus realiza endocitose mediada por receptor e entra na célula.
Ele libera o genoma viral, que se replica e produz muitas partículas virais.
Nas células transfectadas, o complexo de silenciamento induzido por RNA reconhece o genoma viral, desencadeando sua degradação e reduzindo a produção do vírus.
Novos vírus são liberados. Transfira o meio contendo o vírus.
Centrifugue para formar o pellet dos detritos e colete os sobrenadantes contendo o vírus.
Adicione o sobrenatante a células não transfectadas. Incube para infecção viral.
Poços tratados com sobrenadante de células não transfectadas apresentam maior morte celular, comparados aos poços tratados com sobrenadante de células transfectadas com mim
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