Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:08 min. • September 30th, 2026
Inicie com um plasmídeo de minigenoma que imita o genoma do vírus Ebola e codifica proteínas estruturais virais, glicoproteínas e um repórter luciferase.
Adicione plasmídeos auxiliares que codificam a polimerase T7, a nucleoproteína viral e os componentes da polimerase viral essenciais para replicação e transcrição.
Adicione um reagente de transfeção baseado em lipídios aos plasmídeos, vortexe e incube a mistura para formar complexos plasmídeo-lipídios.
Adicione esta mistura a células de rim humano, misture suavemente e incube.
O complexo lipídico funde-se com a célula. Os plasmídeos entram na célula.
Os plasmídeos auxiliares codificam suas respectivas proteínas.
Posteriormente, a polimerase T7 transcreve o minigenoma em RNA genômico viral, que é imediatamente revestido com nucleoproteínas.
O complexo da polimerase viral liga-se ao RNA genômico viral e transcreve-o em RNAs mensageiros virais. Esses RNAs mensageiros produzem proteínas estruturais virais e glicoproteínas.
As proteínas virais se montam para formar partículas semelhantes a vírus não patogênicas, com capacidade de transcrição e replicação, ou trVLPs, contendo o gene repórter luciferase.
Reponha com meio fresco para manter a viab
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos