Geração de um Vírus do Sarampo Recombinante Codificador de Proteína Imunoestimuladora

Inicie com uma suspensão de lipossomos encapsulando o plasmídeo do antígenoma do vírus da raiva recombinante e plasmídeos auxiliares que codificam proteínas virais essenciais.

O plasmídeo do antígenoma contém o DNA complementar do genoma do vírus do sarampo, modificado para expressar proteínas imunoestimuladoras e um repórter fluorescente em células infectadas.

Utilize uma cultura de células produtoras de vírus contendo antibióticos para prevenir contaminação.

Introduza a suspensão de lipossomos na cultura e incube.

Os lipossomos fundem-se com a membrana celular para entregar os plasmídeos.

A maquinaria da célula hospedeira transcreve o cDNA do antígenoma em RNA e os plasmídeos auxiliares em RNAs mensageiros, permitindo a expressão proteica e a formação do complexo de replicação viral. Esse complexo produz RNA genômico, o qual possibilita a expressão de proteínas virais.

O RNA genômico se assembla com proteínas virais para gerar partículas virais recombinantes.

Células infectadas também expressam a proteína relatora fluorescente para visualização microscópica e produzem a proteína imunoestimuladora codificada pelo vírus.

Células infectadas formam sincícios multinucleados, uma característic