Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 3:01 min. • September 30th, 2026
Inicie com um poço de teste contendo células tumorais geneticamente modificadas que expressam um antígeno-alvo, e um poço controle com células tumorais que não possuem o antígeno.
Utilize um engajador biespecífico de células T (BTE) codificado por um transgene viral, com dois sítios de ligação, um para o antígeno-alvo e outro para um receptor específico de células T.
Adicione o BTE e as células T às placas e incube.
No exemplo de teste, o BTE liga cruzadamente a célula tumoral e a célula T, ativando a célula T para liberar grânulos citolíticos.
Isso lisa a célula tumoral, liberando uma enzima intracelular.
No controle, o BTE liga-se apenas à célula T, evitando a lise da célula tumoral.
Centrifugue e colete o sobrenatante.
Adicione um substrato e incube.
A enzima catalisa o substrato em um produto de cor vermelha.
Adicione uma solução de parada e meça a intensidade da cor.
Uma intensidade maior na amostra teste confirma a atividade imunomoduladora específica para o alvo do BTE.
Para iniciar a avaliação da citotoxicidade mediada por células induzida por BTE por meio da liberação de LDH, primeiro isole os produtos do transgene secretados expressos por células-alvo infectadas por vírus e isole as
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