Infecção Intranasal por Herpesvírus Murino em Camundongos para Avaliar as Respostas Imunes do Hospedeiro

Inicie com um camundongo saudável e anestesiado posicionado para administração respiratória.

Administre o herpesvírus murino por via intranasal para iniciar a infecção.

O vírus viaja pelas vias aéreas e atinge os pulmões.

Dentro dos pulmões, o vírus infecta as células epiteliais pulmonares e libera seu nucleocapsídeo.

O genoma viral entra no núcleo e é transcrito em RNA viral.

Um sensor citosólico do hospedeiro reconhece o RNA viral e inicia vias de sinalização que ativam fatores de transcrição específicos. Esses fatores, então, promovem a expressão de genes de citocinas, levando à produção de citocinas antivirais.

Após a infecção, dissecar o camundongo eutanasiado e coletar o tecido pulmonar.

Coloque um lobo pulmonar em um tubo contendo esferas de sílica e adicione meio de cultura frio.

Homogeneíze o tecido para romper as células e liberar componentes intracelulares, incluindo as citocinas antivirais.

Resfrie o homogenato em gelo e, em seguida, repita a homogeneização para garantir a completa ruptura do tecido.

Centrifugue para formar o pellet dos detritos celulares.

Colete o sobrenadante contendo citocinas antivirais para avaliar a resposta imune do hospedeiro à infecção por herpesvírus.

Ino