Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiologia
0 visualizações • 4:33 min. • September 30th, 2026
Retire uma placa de múltiplas cavidades contendo monocamadas de células epiteliais e adicione uma suspensão viral às cavidades.
Incube com agitação ocasional para distribuir uniformemente os vírus. Os vírus se ligam a e entram nas células.
Em um poço, adicione agarose fundida, que se solidifica em uma cobertura semissólida.
Em outro poço, adicione uma camada superior líquida viscosa à base de celulose microcristalina e incube. Sua viscosidade restringe a difusão viral, de forma semelhante à camada superior semissólida.
Dentro da célula, o vírus libera seu genoma e produz novos RNAs e proteínas virais.
Novos vírus se montam, saem das células e causam lise celular.
Vírus liberados infectam células próximas, formando placas.
Aspire a camada líquida e adicione um fixador para preservar as células não lisadas.
Descarte o fixador e remova a camada de agarose.
Adicione um corante que cora as células viáveis, deixando as placas não coradas. Em seguida, remova o corante em excesso.
A sobreposição líquida produz um número de placas comparável ao da sobreposição semissólida, apoiando seu uso como alternativa em ensaios de placa.
No dia seguinte ao plaqueamento, utilize um microscópio invertido para veri
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