Ensaio de organoide de próstata: uma técnica de cultura ex vivo baseada em anel de gel de matriz para estudar a capacidade de diferenciação de células epiteliais da próstata

O epitélio da próstata compreende principalmente células epiteliais basais e epiteliais luminais. Uma monocamada de células basais forma o revestimento externo da glândula e suporta a sobrevivência das células luminais. Por outro lado, as células luminais revestem o lúmen e secretam proteínas específicas da próstata.

Para estudar a diferenciação epitelial prostática ex vivo, comece com uma suspensão de células epiteliais basais da próstata. Misture a suspensão com uma matriz de membrana basal resfriada na proporção desejada. Pipete esta mistura junto à base da parede interior de uma placa de cultura repelente de células. Gire o prato para que a mistura forme um anel ao longo da circunferência do poço.

Incube a placa para permitir que a matriz se solidifique. Complemente a cultura com uma mídia preferida. Os fatores de crescimento na mídia suportam a proliferação de células epiteliais basais. Ao mesmo tempo, a natureza repelente de células da placa de cultura impede qualquer ligação celular, incentivando as células a formar esferóides 3D dentro da matriz.

Com o tempo, os esferóides desenvolvem lúmens delimitados por epitélio de várias camadas. As células epiteliais basais que revest