JoVE Encyclopedia of Experiments
Pesquisa sobre o Câncer
0 vistas • 4:37 min • April 30th, 2023
O biobanco envolve a coleta e armazenamento de amostras de tecido biológico ou fluidos para fins de pesquisa. Para biobanco de amostras de câncer de próstata, primeiro, obtenha uma imagem de ressonância magnética axial ou transversal da próstata para identificar o tumor. Posteriormente, obtenha a imagem coronal ou frontal correspondente para marcar a localização precisa do tumor.
Em seguida, colete a próstata com tumor. Usando tintas de marcação de tecido, pinte o lado esquerdo e direito do órgão para denotar as margens cirúrgicas e identificar a orientação correta dos pedaços de tecido durante a amostragem subsequente.
Coloque a próstata marcada em um aparelho de corte pré-montado, de modo que sua base e ápice fiquem voltados para as paredes opostas, o lado posterior voltado para baixo e o lado anterior voltado para cima. Coloque alfinetes ao redor da próstata para obter um ajuste firme.
Meça o comprimento da próstata da base ao ápice. Compare-o com a imagem coronal para identificar a posição do tumor. Localize os pinos mais próximos da região do tumor. Coloque as lâminas de fatiar em ambos os lados dos pinos marcados. Corte o tecido para obter uma fatia transversal carregando o tumor.
Usando a imagem de ressonância magnética axial como guia, localize o tumor na fatia. Perfure a área desejada do tumor. Armazene a amostra para aplicações de biobanco a jusante.
Após a coleta da amostra, esterilizar a capela de fluxo laminar e o aparelho de corte da próstata com etanol a 70% e pesar a próstata em uma balança padrão em gramas. Em seguida, pintar o lado direito com tinta azul e o lado esquerdo da peça com tinta preta, cobrindo a cápsula cheia e as vesículas seminais com tinta para permitir a discriminação das margens cirúrgicas.
Para cortar a próstata, coloque o tecido com a base e o ápice voltados para paredes opostas do aparelho com o lado posterior voltado para baixo e o lado anterior para cima. Coloque pinos de ouro ao redor da amostra de tecido, empurrando a próstata levemente para dentro, se necessário, para obter um ajuste confortável, e meça o comprimento da próstata da base ao ápice para comparar essa medida com o comprimento da próstata medido por ressonância magnética.
Se a próstata encolheu, ajuste a posição de corte prevista pela porcentagem apropriada da redução. Em seguida, meça da base até a fatia transversal desejada e selecione o pino que fica mais próximo dessa medida para cortar. Usando luvas de cota de malha para evitar ferimentos, coloque as lâminas do dispositivo de corte em ambos os lados do pino identificado e use o espaçador para manter as lâminas separadas por 5 milímetros.
Para adquirir a fatia, use movimentos longos para mover lenta mas firmemente as lâminas para baixo, para frente e para trás, confirmando pela sensação de que uma fatia completa foi separada antes de desmontar o aparelho. Em seguida, remova as paredes e os alfinetes e use luvas para transferir cuidadosamente a fatia para um pedaço estéril de papelão.
Depois de adquirir a amostra, inspecione visualmente o corte transversal para comparação com a imagem de ressonância magnética axial. Em alguns casos, a área do tumor pode parecer mais pálida do que o tecido circundante. Palpe suavemente a fatia transversal. O tumor pode parecer mais firme do que o tecido circundante. Usando a imagem de ressonância magnética axial como guia, selecione uma ou mais áreas para amostragem e use um punção de 6 milímetros para empurrar para baixo a área de interesse do tecido.
Torça o punção de tecido no local e para baixo contra a rolha para garantir uma separação completa, usando um bisturi afiado para separar a amostra de biópsia da amostra, conforme necessário. Quando a amostra tiver sido adquirida, remova o punção e use o êmbolo para ejetar a amostra no recipiente apropriado para a análise subsequente a jusante.