Extração de rim intacto de camundongo: uma técnica para obter rim sem cápsula renal de modelos murinos

Em roedores, o rim tem uma cobertura externa fibrosa protetora chamada cápsula renal e uma camada de gordura perinefrica acima dela. Para extrair o rim murino sem as camadas circundantes, comece posicionando um camundongo sacrificado em decúbito dorsal em uma cama cirúrgica.

Incisar a pele abdominal e as camadas musculares. Continue a fazer incisões longitudinais até que a cavidade abdominal esteja exposta. Em seguida, localize os intestinos e levante-os ligeiramente. Corte embaixo dos intestinos e remova-os do corpo do camundongo para expor os rins.

Em seguida, encontre o ureter e corte os tecidos conjuntivos subjacentes para que os rins se separem da cavidade abdominal. Extirpar ambos os rins individualmente. Coloque o rim extraído em um prato contendo um tampão gelado e observe-o sob um microscópio de dissecação.

Agora, remova a gordura perinefrica do rim para visualizar a pelve renal, uma parte dilatada do ureter em forma de funil. Corte uma parte da pelve renal da base para remover os restos do ureter.

Finalmente, perfure superficialmente a cápsula renal fibrosa externa. Usando a abertura criada, retire cuidadosamente toda a cápsula renal da superfície do rim. Isso ajuda a remover a glândula adrenal - uma glândula endócrina ligada à cápsula renal - e obter um rim intacto.

Usando uma pinça de tecido interno e uma tesoura de dissecção interna, aperte os intestinos e afaste-os da parede abdominal. Simultaneamente, corte a parte inferior dos intestinos do corpo no duodeno proximal e no cólon distal para obter acesso ao espaço retroperitoneal que contém os rins.

Aperte e levante suavemente a extremidade distal do ureter com uma pinça de tecido. Usando a tesoura de dissecação, corte embaixo do ureter comprimido em direção ao rim até que ele se libere do tecido conjuntivo circundante. Uma vez que os rins estejam expostos, extraia-os individualmente.

Encha um prato revestido com elastômero de silicone com uma solução KRB gelada. Transfira o rim para a placa de dissecção e certifique-se de que está completamente submerso. Use uma tesoura de mola fina e uma pinça interna para remover o tecido adiposo da base do rim para expor a pelve renal distal ou FR e o ureter proximal.

Remova o ureter proximal e uma parte do RP distal da base usando uma tesoura de mola fina e uma pinça. Perfure a cápsula renal externa com uma pinça de ponta fina, inclinando as pontas para longe do corpo do rim. Usando uma pinça com cada mão, aperte as pontas soltas da cápsula e separe-as até que a membrana restante da cápsula renal seja totalmente removida

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