Xenoenxerto tumoral derivado do paciente: uma técnica para gerar modelo experimental de camundongo para avaliação do carcinoma de células uroteliais

Para um carcinoma de células uroteliais derivado do paciente ou geração de modelo de camundongo UCC, um camundongo imunocomprometido é inoculado com células UCC humanas para estudar a progressão e metástase do câncer.

Para iniciar o xenoenxerto, pegue um camundongo fêmea anestesiado imunocomprometido. Raspe a parte inferior das costas do mouse para expor sua região pélvica. Agora, coloque o mouse em decúbito dorsal com a pele exposta em contato com uma almofada dispersiva que serve como eletrodo de aterramento para completar o circuito durante a estimulação elétrica.

Em seguida, pegue um angiocateter, um tubo oco fino, preso a um fio-guia. Lubrifique a superfície do cateter e insira-o na uretra do camundongo para acessar sua bexiga. Coloque um eletrodo ativo no fio-guia para estimular a parede da bexiga. Este procedimento ajuda a romper a camada de mucopolissacarídeo, uma barreira protetora da mucosa da bexiga, e auxilia no subsequente enxerto de células tumorais.

Agora, remova suavemente o conjunto angiocateter-fio-guia da uretra. Pegue um segundo angiocateter conectado a uma seringa contendo a suspensão de células UCC e insira-o na uretra do camundongo. Injete as células UCC na bexiga do camundongo. As células cancerígenas interagem com a mucosa da bexiga para formar um tumor que pode eventualmente se espalhar para outros tecidos e órgãos.

Para preparar o animal para a injeção de células UCC, use creme depilatório para raspar a parte inferior das costas de um camundongo NOD / SCID fêmea de 6 a 8 semanas de idade. Para administrar células UCC na bexiga, primeiro, configure uma máquina de eletrocautério monopolar com uma potência de 4 watts. Depois de anestesiar o camundongo, coloque-o em decúbito dorsal com o focinho em um cone nasal de isoflurano e as costas nuas firmemente aterradas em um eletrodo dispersivo.

Lubrifique um angiocateter de calibre 24 com geléia lubrificante e, em seguida, insira o angiocateter suavemente, mas com firmeza, através da uretra do camundongo. Se o cateter dobrar na entrada, insira o fio-guia até a metade do cateter para fornecer estabilidade. Em seguida, insira totalmente o fio-guia reto de núcleo fixo de 0,64 milímetro 1 milímetro após a extremidade do angiocateter.

Segure o pino monopolar no fio-guia por 1 segundo, permitindo irritação elétrica da mucosa da bexiga. Conecte um angiocateter estéril fresco à seringa Luer-Lok de 1 mililitro e retire até 200 microlitros de células UCC. Remova o fio-guia e o angiocateter da uretra e, em seguida, insira o angiocateter com uma seringa de células presa a ele.

Injete 50 microlitros das células na bexiga do camundongo e, para permitir que as células adiram à parede da bexiga, aguarde alguns segundos antes de remover o angiocateter. Por fim, remova o mouse do cone do nariz de isoflurano e da almofada de aterramento e observe-o por 1 hora após o procedimento quanto a sinais de angústia.

• Urothelial Cell Carcinoma (UCC) - A type of bladder cancer studied using xenograft models.
• Xenografting - The process of grafting or transplanting cells between species.
• Immunocompromised Mouse - A mouse with a weakened immune system, ideal for xenografting.
• Angiocatheter - A thin, hollow tube used in medical procedures for patient-derived xenograft models.
• Bladder Mucosa - The inner lining of the bladder, interacted with by UCC cells.

• Introduce Urothelial Cell Carcinoma - A type of bladder cancer studied in mouse models (e.g., UCC).
• Outline Xenografting - The process of transplanting tumor cells to a mouse to simulate cancer (e.g., xenografting).
• Explain Angiocatheter Use - Angiocatheters are inserted into mouse's urethra to access bladder for xenografting.
• Connect to Experiment - UCC cells are engrafted into mouse bladder, potentially leading to metastasis.

• What is a Urothelial Cell Carcinoma and how is it studied using xenografting?
• How is an angiocatheter utilized in this process?
• How does the experiment connect to actual progression of UCC?

• Practical Applications - Xenograft models can aid research of cancer treatments (e.g., UCC).
• Industry Impact - The medical field, particularly cancer research, benefits from these models (e.g., healthcare).
• Societal Importance - Possible advancements in cancer treatment improves overall healthcare (e.g., cancer research).
• Link to Scientific Advancements - Development and use of patient-derived xenograft models in research.