Derivação de podócitos renais humanos de células-tronco pluripotentes induzidas: um procedimento para diferenciação direcionada de podócitos renais maduros de células-tronco

As células maduras podem ser reprogramadas para recuperar seu estado indiferenciado e proliferativo semelhante a células-tronco. Essas células reprogramadas são chamadas de células-tronco pluripotentes induzidas ou IPSCs. Para diferenciar células pluripotentes em células especializadas em podócitos envolvidas na filtração de resíduos dos rins, comece tomando uma suspensão de IPSCs humanas em um meio de indução de mesoderma.

Transfira esta suspensão para uma placa de cultura revestida com matriz basal e incuba. A matriz de embasamento facilita a adesão de IPSCs na base. Posteriormente, os fatores específicos presentes no meio induzem a diferenciação das IPSCs nas células do mesoderma, as células precursoras dos podócitos. Aspire a mídia gasta.

Completar a placa com o volume desejado de um meio de indução intermédio do mesoderma e incubar durante um período prolongado. Esta etapa leva à diferenciação das células mesodérmicas em podócitos imaturos. Substitua o meio intermediário de indução do mesoderma por uma solução de tripsina para dissociar as células aderentes da placa.

Em seguida, centrifugue para peletizar as células. Rejeitar o sobrenadante que contém a solução de tripsina e o