Isolamento de células musculares lisas detrusoras: um procedimento de digestão enzimática para obter células DSM de amostras de bexiga urinária humana

As células do músculo liso detrusor, ou DSM, presentes na parede da bexiga urinária constituem a unidade funcional primária da bexiga. Essas células relaxam para facilitar o armazenamento de urina na bexiga e se contraem para liberar a urina.

Para isolar as células do DSM, comece coletando uma amostra colhida da bexiga urinária humana. Lave a amostra para remover quaisquer vestígios de sangue e detritos. Em seguida, prenda o tecido com a superfície mucosa voltada para cima. Extirpar a gordura, os vasos sanguíneos e a camada mucosa para expor a camada muscular detrusora subjacente. Em seguida, corte o tecido livre de mucosa em pequenos fragmentos.

Trate os fragmentos de tecido com um coquetel de digestão contendo papaína e incuba. A papaína, uma enzima proteolítica, promove a digestão de proteínas na matriz extracelular que mantêm as células unidas e inicia o afrouxamento das células na matriz. Agora, remova o sobrenadante contendo papaína.

Adicione a suspensão da enzima colagenase aos fragmentos de tecido e incube à temperatura fisiológica. A colagenase quebra a matriz extracelular e facilita a dissociação das células DSM. A incubação à temperatura fisiológica ajuda a preservar a i