Isolamento de glomérulos: uma técnica para obter glomérulos intactos do rim murino

0 visualizações • 3:35 min. • April 30th, 2023

Nos rins dos vertebrados, os néfrons consistem em múltiplos glomérulos - uma densa rede de vasos sanguíneos - que desempenham um papel primordial na filtração de resíduos do corpo.

Para isolar os glomérulos, comece tomando um rim de camundongo recém-dissecado. Use uma pinça para retirar a cápsula renal do rim e coloque o rim limpo em uma nova placa de cultura. Agora, posicione o prato sobre o gelo para evitar a degradação renal. Pique o rim em pedaços pequenos.

Em seguida, ressuspenda os pedaços de rim picados em uma solução tampão adequada. Filtrar a suspensão de tecido através de um filtro de malha de grandes dimensões e recolher o fluxo num prato fresco. Repita esta etapa mais algumas vezes, diminuindo progressivamente o tamanho da malha a cada vez, até que os glomérulos se dissociem dos fragmentos renais.

Por fim, lave o filtro com o meio de cultura desejado para coletar os glomérulos menores aprisionados enquanto os fragmentos renais permanecem no filtrado. Transfira os glomérulos para uma placa de fixação ultrabaixa. Visualize a placa usando um microscópio de luz invertida.

Com a ajuda de uma micropipeta, capture um único glomérulo e transfira-o para um poço fresco. Suplement

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Rim de camundongo