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Para esvaziar e lavar a bexiga urinária de um camundongo, comece tomando um camundongo fêmea anestesiado na posição supina. Em seguida, obtenha um cateter de tamanho apropriado. Lubrifique a ponta do cateter para reduzir o atrito e garantir uma inserção uretral suave. Em seguida, insira lenta e suavemente o cateter lubrificado, passando-o pela abertura uretral, na bexiga.
Após o cateterismo bem-sucedido, a urina começa a drenar da bexiga para o cateter. Agora, esvazie o cateter cheio de urina. Usando uma pipeta, adicione uma solução salina tamponada adequada na extremidade externa do cateter enquanto sua extremidade oposta está dentro da bexiga. Na extremidade externa do cateter e, em seguida, coloque uma seringa. Empurre suavemente a seringa para fornecer a solução salina à bexiga.
Agora, remova a seringa. Permita que a solução salina, juntamente com a urina residual, seja drenada para fora da bexiga através do cateter. Em seguida, desocupe a urina residual misturada com solução salina do cateter. Repita a lavagem da bexiga com solução salina duas vezes para garantir a remoção completa da urina da bexiga. O mouse preparado está finalmente pronto para outros procedimentos experimentais.
Para iniciar este procedimento, autoclave todos os instrumentos cirúrgicos e esterilize o espaço de trabalho com etanol a 70%. Pulverize os instrumentos cirúrgicos e as luvas com etanol a 70% com frequência ao realizar os procedimentos subsequentes para manter as condições estéreis.
Para começar, anestesie o mouse e raspe a área cirúrgica. Para esgotar a urina, aplique lubrificante no cateter e certifique-se de que sua superfície externa esteja totalmente coberta. Em seguida, insira o cateter na abertura uretral do mouse e empurre-o lentamente até atingir a bexiga. Pressione suavemente o abdômen para ajudar na depleção da urina.
Em seguida, descarte a urina com uma pipeta em um copo de resíduos. Em seguida, pipete 80 microlitros de PBS na extremidade externa do cateter com a outra extremidade ainda na bexiga. Em seguida, coloque cuidadosamente uma seringa de 1 mililitro no cateter. Empurre suavemente a seringa para injetar PBS na bexiga.
Deixe um pouco de PBS no cateter para evitar a criação de bolhas de ar na bexiga. Depois, remova a seringa e espere que o PBS seja drenado para fora da bexiga. Pressione suavemente o abdômen para evacuar o PBS. Em seguida, descarte o PBS no cateter com a pipeta no copo de resíduos. Repita a lavagem do PBS por mais duas vezes.
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