Encapsulamento de siRNA em exossomos usando eletroporação: uma técnica baseada em pulso elétrico para carregar siRNA em exossomos

Os exossomos - vesículas de membrana derivadas de células de tamanho nanométrico - exibem potencial como veículos de entrega terapêutica para RNA ou siRNA interferente de fita dupla pequena.

Após a liberação no citoplasma da célula-alvo, o siRNA se liga ao complexo silenciador induzido por RNA. O complexo ativado então reconhece e se liga a um mRNA específico, regulando negativamente sua expressão e mediando o silenciamento gênico.

Para encapsular o siRNA em exossomos, primeiro, resfrie uma cubeta de eletroporação no gelo. Em seguida, misture exossomos e siRNA específico em um tubo na proporção desejada usando um tampão de eletroporação adequado. Agora, transfira essa mistura para a cubeta pré-resfriada.

Feche a cubeta e coloque-a no suporte da cubeta do eletroporador. Gire a roda giratória para garantir que a cubeta entre em contato com os eletrodos de eletroporação. Agora, execute o programa de eletroporação selecionado.

Durante a eletroporação, os pulsos elétricos perturbam a bicamada fosfolipídica dos exossomos suspensos no tampão condutor. Isso resulta na formação de poros transitórios na membrana do exossomo, promovendo a difusão de siRNA na vesícula. O tampão ajuda a preveni