Microinjeção intravenosa de nefrotoxinas em embrião de peixe-zebra: uma técnica para administrar agentes nefrotóxicos na corrente sanguínea de embriões de peixe-zebra

A microinjeção intravenosa facilita a entrega de moléculas de interesse na corrente sanguínea de um animal receptor. Para entregar nefrotoxinas em um embrião de peixe-zebra, primeiro prepare uma concentração apropriada da solução de nefrotoxina desejada.

Usando uma ponta de carregamento de gel fino, carregue esta solução de nefrotoxina em uma agulha de microinjeção com uma ponta angular afiada. Suspenda a agulha verticalmente para permitir que a solução de nefrotoxina preencha a ponta da agulha por gravidade. Agora, prenda a agulha de microinjeção carregada no suporte de um micromanipulador.

Posteriormente, transfira um embrião de peixe-zebra anestesiado para o molde de microinjeção pré-fabricado. Alinhe o embrião no molde com a cabeça orientada para dentro do poço e a cauda para fora do poço, melhorando a acessibilidade à cauda para microinjeção. Em seguida, posicione com precisão a ponta da agulha perto do embrião.

Injete a solução de nefrotoxina na veia da cauda do embrião. Os agentes nefrotóxicos injetados se espalham pela circulação e atingem órgãos distantes, como o rim. Retraia suavemente a agulha. Transfira o embrião para um prato fresco contendo mídia embrionária e deixe-o