Aspiração de fluidos de glomérulos de camundongos: um método para aspirar fluido glomerular de camundongos usando micropuntura mediada por dois fótons

No rim, o glomérulo - um feixe de pequenos vasos sanguíneos encerrados na cápsula de Bowman - inicia a filtragem do sangue e expele o fluido residual para o espaço de Bowman circundante. A investigação do conteúdo do líquido glomerular ajuda a entender a fisiologia renal.

Para aspirar o fluido glomerular, prepare um camundongo anestesiado com o rim exteriorizado cirurgicamente. Agora, injete corante fluorescente de dextrano nos vasos sanguíneos atrás da órbita ocular do camundongo. As moléculas fluorescentes de dextrano se movem pela corrente sanguínea e atingem o rim.

Devido ao alto peso molecular do dextrano, o corante fluorescente fica retido dentro do glomérulo, conferindo-lhe uma cor verde. Sob um microscópio de dois fótons, que permite a visualização de estruturas profundamente assentadas, localize um glomérulo adequado para obter acesso adequado ao fluido glomerular.

Em seguida, alinhe uma ponta de micropipeta revestida com nanopartículas fluorescente vermelha com o eixo lateral do rim. Usando um micromanipulador, avance a ponta da pipeta para penetrar no rim. À medida que a ponta atinge o glomérulo alvo, defina a taxa de aspiração desejada para aspirar o fluido glomerular d