Entrega de genes baseada em vírus adeno-associados recombinantes: uma técnica para entrega de transgenes e expressão cardíaca específica em modelo de roedor

O vírus adeno-associado recombinante, rAAV, é um pequeno vírus de DNA de fita simples geneticamente modificado para atingir um tipo específico de célula e transportar sua carga genética para o núcleo da célula hospedeira para expressão gênica.

Comece restringindo um filhote de camundongo crio-anestesiado. Esterilize a pele posterior e injete subcutaneamente o vetor rAAV carregando o transgene desejado ao longo de um promotor cardíaco específico. O vetor é absorvido pelo sistema vascular e atinge órgãos distantes, incluindo o coração.

Aqui, o vírus recombinante se liga à superfície do cardiomiócito e é internalizado via endocitose em um endossomo. Dentro do endossomo, o capsídeo viral se desmonta parcialmente, expondo as proteínas líticas virais. Essa proteína induz poros na membrana endossômica, através dos quais o vetor escapa para o citoplasma.

O vetor viaja através dos microtúbulos citoplasmáticos e entra pelo poro nuclear. Uma vez no núcleo, o capsídeo viral se desmonta para liberar seu genoma. O DNA de fita simples que carrega o gene alvo é então convertido em DNA de fita dupla.

Após a transcrição do DNA, o mRNA produzido se move para o citoplasma. Aqui, o mRNA sofre tradução,