Técnicas de Transferência de Genes

Neste vídeo, descrevemos o procedimento para introduzir ácidos nucléicos em células de mamíferos aderentes usando o carregamento de contas.

Neste vídeo, demonstramos a entrega da construção do gene drive no embrião do mosquito Anopheles gambiae por meio da técnica de microinjeção de embriões. Este procedimento permite a integração da construção de DNA entregue, por meio de recombinação homóloga, nas células germinativas para gerar uma população de mosquitos transformada.

Neste vídeo, demonstramos a microinjeção robótica de polissacarídeos marcados com fluorescência em neurônios piramidais em fatias organotípicas do cérebro embrionário de camundongo usando um autoinjetor. O autoinjetor é uma plataforma robótica que utiliza imagens adquiridas de um microscópio para a entrega precisa de biomoléculas de interesse em células individuais.

Este vídeo descreve a técnica de transfecção genética in vivo de hepatócitos murinos por injeção hidrodinâmica da veia da cauda. Este sistema de transfecção gera uma expressão de longo prazo do transgene nos hepatócitos.

Neste vídeo, demonstramos a transformação genética do genoma do arroz usando um vetor binário de Agrobacterium tumefaciens. Esta bactéria facilita a transferência de um plasmídeo de DNA estranho usando proteínas de virulência de Agrobacterium.

Este vídeo demonstra a técnica de eletroporação que introduz o DNA do plasmídeo codificador de proteínas fluorescentes em precursores de células granulares cerebelares primárias de camundongos.

Neste vídeo, descrevemos a nucleofecção, um procedimento de transfecção baseado em eletroporação para fornecer DNA de plasmídeo codificador de proteína repórter fluorescente na forma de esporozoíto do parasita Eimeria de galinha.

Neste vídeo, demonstramos o protocolo de entrega de genes mediada por arma de genes biolísticos em células cultivadas. Este método fornece um método simples de transformação genética estável usando uma quantidade mínima de DNA.

Neste vídeo, demonstramos a transfecção guiada magneticamente do DNA do plasmídeo em cultura de células neuronais primárias. A magnetofecção usa um campo magnético externo para guiar a entrega de plasmídeos ligados a nanopartículas magnéticas no citoplasma celular.

Neste vídeo, demonstramos a entrega de genes baseados em adenovírus associados recombinantes no filhote de camundongo. Este método ajuda no estudo da expressão gênica nas células-alvo.

Este vídeo demonstra uma técnica para entrega baseada em nanolâminas do complexo ribonucleoproteína Cas9-sgRNA dentro de células-alvo para edição do genoma. As nanolâminas são partículas semelhantes a vírus desprovidas da capacidade de se multiplicar e infectar células vizinhas, portanto, são muito úteis para o transporte rápido e dependente da dose de bio e nanomateriais.

Este vídeo descreve a injeção pronuclear de vetores lentivirais no espaço perivitelino de um embrião de camundongo fertilizado. O lentivírus contém o transgene, que é incorporado ao genoma do embrião fertilizado, dando origem a camundongos transgênicos.

Neste vídeo, demonstramos a permeação assistida por laser da camada protetora da zona pelúcida em óvulos fertilizados com camundongos para facilitar a entrega do gene lentiviral. O lentivírus permite a geração de animais transgênicos com um gene de interesse integrado de forma estável em seu genoma.

Neste vídeo, demonstramos a transfecção guiada magneticamente do DNA do plasmídeo em cultura de células neuronais primárias. A magnetofecção usa um campo magnético externo para guiar a entrega de plasmídeos ligados a nanopartículas magnéticas no citoplasma celular.