Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 2:15 min. • July 8th, 2025
As nanolâminas são partículas sintéticas semelhantes a vírus sem o material genético viral encapsulado, tornando-as transportadoras adequadas para cargas estrangeiras nas células hospedeiras. Essas nanolâminas são construídas usando o núcleo retroviral do vírus da leucemia de camundongo cercado pela membrana de bicamada lipídica derivada das células produtoras eucarióticas usadas para montar nanolâminas in vitro.
O núcleo contém a enzima Cas9 complexada com o sgRNA específico para a sequência do genoma alvo. As proteínas centrais são cercadas pelas proteínas do envelope que contêm um domínio transmembrana ou TM que passa pela bicamada lipídica. A MT se liga a um domínio de superfície glicoproteinácea extracelular ou SU que se projeta do revestimento de bicamada.
Para usar nanoblades para edição de genes, pegue uma cultura de células-alvo aderentes e complemente-a com a solução de nanoblade. Na cultura, o SU saliente de uma nanolâmina reconhece o receptor correspondente na superfície da célula hospedeira e se liga a ele. Isso leva a modificações na estrutura do domínio SU, facilitando sua liberação.
Essas mudanças desencadeiam as mudanças conformacionais no domínio TM, que então se
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