Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 3:59 min. • July 8th, 2025
Para entrega de DNA de plasmídeo baseado em eletroporação em células neuronais primárias, comece com uma suspensão de células em meios de eletroporação adequados. Adicione DNA de plasmídeo codificador de proteína fluorescente para preparar a mistura de eletroporação.
Transfira suavemente a mistura de eletroporação para uma cubeta de eletroporação, evitando bolhas de ar que possam afetar negativamente a eficiência da eletroporação. Transfira a cubeta para o suporte da cubeta do eletroporador; Defina os parâmetros de eletroporação. Inicie a eletroporação.
Os pulsos elétricos curtos de alta tensão aplicados através da membrana celular causam acúmulo de carga diferencial em ambos os lados da membrana, aumentando o potencial transmembrana, a voltagem através da membrana celular.
Quando o potencial transmembrana induzido excede o potencial de quebra da bicamada lipídica, a bicamada lipídica se desestabiliza com a mudança de configuração localizada, formando poros hidrofílicos transitórios na membrana celular. Os poros com tamanho adequado fornecem um caminho para o DNA do plasmídeo entrar no citoplasma da célula.
Após a conclusão da eletroporação, a bicamada lipídica é selada novamente,
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