Cromatografia gasosa Headspace: uma técnica para avaliar a concentração de etanol em embriões de peixe-zebra

Para analisar a concentração de etanol - um composto orgânico volátil, comece tomando o sobrenadante de cultura de embriões de peixe-zebra homogeneizado tratado com etanol em um frasco de cromatografia. O sobrenadante contém outros compostos orgânicos não voláteis além do etanol. Coloque o frasco selado em uma unidade amostradora de cromatografia e aqueça-o a uma temperatura apropriada.

Durante o aquecimento, o etanol vaporiza e migra para a fase gasosa ou headspace, deixando para trás os resíduos não voláteis. Isso permite que o amostrador introduza etanol gasoso em um fluxo contínuo de gás de arraste. Isso atua como uma fase móvel.

O etanol passa pela coluna de cromatografia enrolada pré-aquecida, que contém um leito compactado da fase estacionária líquida. Devido à sua volatilidade e polaridade, as moléculas de etanol em movimento começam a adsorver sobre as partículas da fase estacionária, particionando-se na fase estacionária.

Devido à alta temperatura da coluna, a adsorção de moléculas de etanol é instável e temporária, permitindo que essas moléculas se dessorvam gradualmente e migrem ao longo do fluxo do gás transportador. Essas moléculas de etanol passam por uma série de ev