Técnicas de Cromatografia

Neste vídeo, demonstramos uma técnica de cromatografia de troca aniônica para purificar a proteína de ligação ao cálcio humano S100A12 com base na carga superficial líquida da proteína de uma cultura de Escherichia coli.

Neste vídeo, demonstramos a purificação da proteína de ligação ao cálcio de um lisado de células dialisadas por meio de cromatografia de interação hidrofóbica dependente de cálcio. As proteínas de ligação ao cálcio expõem uma região hidrofóbica ao se ligarem ao cálcio, facilitando a interação com um grupo hidrofóbico na resina. Posteriormente, essas proteínas são eluídas usando quelante de cálcio EDTA que reverte a interação.

Neste vídeo, demonstramos a técnica de cromatografia de afinidade de níquel para purificar enzimas pirofosfoquinase marcadas com histidina da bactéria Clostridium difficile.

Este vídeo demonstra a separação de ácidos micólicos baseada em cromatografia em camada fina. Essa técnica separa os diferentes ácidos micólicos - lipídios de cadeia longa presentes na parede celular das micobactérias - com base em sua polaridade.

Neste vídeo, demonstramos a técnica para isolar o baculovírus de um sobrenadante de célula de inseto usando cromatografia de afinidade de heparina. O isolamento é facilitado pela afinidade entre a heparina na coluna e a glicoproteína do envelope do baculovírus.

Este vídeo demonstra a técnica de cromatografia de troca catiônica para isolar a proteína recombinante do lisado de proteína de célula de inseto.

Este vídeo demonstra o princípio da separação de compostos polares hidrofílicos usando cromatografia líquida de interação hidrofílica. Essa técnica auxilia na purificação de vários analitos polares, incluindo N-glicanos.

Neste vídeo, demonstramos uma técnica - cromatografia de exclusão de tamanho - para separar uma população heterogênea de vesículas de membrana externa ou OMVs derivadas de bactérias. Essas vesículas são estruturas esféricas nanométricas e são separadas em subpopulações grandes e pequenas com base em seu tamanho por meio de cromatografia de exclusão de tamanho.

Este vídeo demonstra a caracterização baseada em cromatografia líquida de interação hidrofóbica de conjugados anticorpo-medicamento. Usando uma coluna de cromatografia baseada em ligante butílico, os conjugados anticorpo-medicamento são caracterizados por meio de interações hidrofóbicas com o ligante.

Neste vídeo, demonstramos a detecção de ácidos siálicos, ácido N-acetilneuramínico e ácido N-glicolilneuramínico, usando cromatografia líquida de alta eficiência, HPLC, após derivatização com um reagente de marcação fluorescente adequado para auxiliar na detecção de fluorescência.

Neste vídeo, demonstramos uma técnica de cromatografia de exclusão de tamanho de detecção de fluorescência para rastrear a estabilidade da proteína de membrana fundida com proteína fluorescente verde (GFP) em Escherichia coli após a solubilização do detergente. Proteínas que exibem um pico simétrico no perfil de exclusão de tamanho com pouca ou nenhuma GFP livre indicam proteínas purificadas com degradação e agregação mínimas, que podem ser posteriormente selecionadas para análise...

Este vídeo descreve uma técnica de cromatografia de afinidade para purificar anticorpos monoclonais 2F5 usando os ligantes DsRed-2F5-Epitope ou DFE. Os anticorpos monoclonais 2F5 purificados são medicamentos essenciais na imunoterapia.

Este vídeo demonstra um ensaio enzimático baseado em cromatografia em camada fina para determinar a atividade da pirofosfoquinase usando nucleotídeos radiomarcados. O método fornece informações sobre a síntese de nucleotídeos e reações de fosfotransferência.

Este vídeo demonstra o uso da cromatografia gasosa headspace para determinar as concentrações de etanol em embriões de peixe-zebra. Este método fornece uma ferramenta útil para análise qualitativa e quantitativa de compostos orgânicos voláteis.

Este vídeo demonstra uma técnica para a separação preliminar e quantificação de lipídios de neutrófilos derivados do sangue periférico humano. Essa técnica auxilia na avaliação inicial dos analitos alvo antes de prosseguir com a HPLC.