Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 4:15 min. • July 8th, 2025
Glicosaminoglicanos sulfatados como sulfatos de heparan, HSs, são polissacarídeos sulfatados lineares carregados negativamente de comprimentos de cadeia variáveis, ligados a proteínas da superfície celular.
Para estimar HSs de diferentes comprimentos isolados do tecido pulmonar de camundongo, comece com a montagem do de gel. Encha-o parcialmente com solução de acrilamida-bisacrilamida altamente concentrada, incluindo agentes catalisadores - persulfato de amônio e tetra-metil-etileno-diamina. Cubra com água para evitar o contato com o ar, o que pode inibir a polimerização. Incubar.
Os agentes catalisadores induzem a polimerização da acrilamida-bisacrilamida, formando um gel de resolução de poros pequenos. Descarte a água. Adicione baixa concentração de solução de acrilamida-bisacrilamida com agentes catalisadores. Insira um pente de gel para criar poços. A solução polimeriza, formando gel de empilhamento de poros grandes.
Carregue as câmaras do tanque de eletroforese com tampão de corrida para obter a condutividade elétrica ideal durante a eletroforese.
Dissolva a mistura HS no tampão de carregamento contendo corante de rastreamento e sacarose. Em seguida, transfira essa mistura e a
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