Técnicas de Eletroforese

Este vídeo demonstra o procedimento de separação de sulfatos de heparano isolados de tecido pulmonar de camundongo usando eletroforese em gel de poliacrilamida.

Este vídeo demonstra uma técnica de separação desnaturante baseada em poliacrilamida para proteínas. Essa técnica auxilia na identificação preliminar de proteínas com base em seus pesos moleculares.

Neste vídeo, demonstramos uma eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante para a separação de espécies de RNA fosforiladas de suas contrapartes não fosforiladas. As espécies de RNA são marcadas com fluorescência para detecção a laser no gel.

Este vídeo demonstra a separação bidimensional semi-desnaturante de fibras amilóides em gel de agarose em gel de agarose. A técnica separa os agregados amilóides polimórficos com base em seu tamanho heterogêneo.

Neste vídeo, demonstramos uma técnica eletroforética, chamada PAGE nativa azul, para a análise de complexos de proteínas respiratórias mitocondriais em seu estado nativamente dobrado e funcionalmente ativo. O corante aniônico azul de Coomassie faz com que os complexos de proteínas fiquem carregados negativamente, permitindo a separação com base no tamanho e na estrutura.

Este vídeo descreve o PAGE multimérico para separar complexos de proteínas nativas de homogeneizados de tecidos. A técnica é um híbrido das técnicas PAGE e SDS-PAGE nativas azuis. Os complexos separados podem ser caracterizados e estudados por seu papel no funcionamento celular.

Neste vídeo, demonstramos a separação do DNA bacteriano amplificado por PCR usando eletroforese em gel de agarose. O gel de agarose funciona como uma peneira molecular, permitindo que o DNA carregado negativamente migre com base em seu tamanho sob um campo elétrico aplicado.

Este vídeo descreve a técnica de eletroforese capilar para analisar amplicons de PCR marcados com fluorescência obtidos de várias amostras com base em seu tamanho. Ele gera um padrão migratório que determina os comprimentos dos pares de bases dos fragmentos com a ajuda do corante fluorescente marcado em cada fragmento.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio de eletroforese alcalina de célula única para quantificar quebras de DNA de fita simples e dupla em células tratadas com doxorrubicina. As condições alcalinas interrompem as ligações de hidrogênio entre os pares de bases do DNA, resultando no desenrolamento completo e na separação das fitas de DNA. Isso permite a migração diferencial de fragmentos de DNA não danificados e danificados em gel de agarose após eletroforese, revelando uma estrutura em forma de...

Este vídeo descreve a técnica de eletroforese capilar microfluídica para separar amplicons de PCR com base em seu tamanho. Essa técnica ajuda no dimensionamento de fragmentos usando corantes fluorescentes e marcadores de tamanho molecular padrão.

Este vídeo descreve a técnica de separação das amostras de proteínas por SDS-PAGE não redutor para analisar os complexos de proteínas multiméricas. Esta técnica retém as subunidades multímeras de uma proteína mantida pelas ligações dissulfeto que podem ser posteriormente analisadas por western blotting.

Este vídeo descreve uma técnica para separar moléculas complexas de extratos de plantas usando foco isoelétrico em fase líquida. Essa técnica ajuda a purificar biomoléculas complexas em seu estado nativo, que podem ser usadas para várias aplicações a jusante.

Este vídeo descreve o método para analisar a interação proteína-ligante por eletroforese capilar de afinidade de mudança de mobilidade. Este método pode ser usado para caracterizar o comportamento de ligação de uma proteína com vários ligantes carregados.

Neste vídeo, demonstramos um método de eletroforese em gel bidimensional que separa proteínas individuais de uma mistura complexa de proteínas obtida de tecidos tumorais de adenoma hipofisário humano não funcional (NFPA). As proteínas são separadas com base em sua carga elétrica na primeira dimensão e posteriormente separadas com base em pesos moleculares na segunda dimensão.

Este vídeo demonstra a técnica de eletroforese em gel de zimografia para avaliar a atividade das metaloproteinases da matriz (MMPs) presentes no sobrenadante da cultura de células. As MMPs ativas degradam o substrato específico da MMP incorporado em um gel de poliacrilamida, que aparece como faixas transparentes contra um fundo manchado escuro após a coloração.