Eletroforese capilar microfluídica para dimensionamento de fragmentos de produtos de PCR: uma técnica de separação eletroforética baseada em microchip para separar fragmentos de DNA com base no tamanho

A eletroforese microfluídica é uma técnica para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes dentro de microcapilares.

Para começar, pegue um chip microfluídico de vários poços com poços designados para a mistura de polímero à base de gel e corante fluorescente, amostras de DNA e uma escada de DNA de peso molecular conhecida. Esses poços estão interligados por meio de uma rede de microcanais.

Dispense a mistura de gel-corante em poços alocados. Monte o chip em uma estação de escorva pré-equipada com uma seringa vazia. Pressione o êmbolo da seringa, aplicando pressão para forçar a mistura de gel-corante no microcanal de separação.

Remova o cavaco e pipete outros componentes em seus respectivos poços. Adicione um marcador - um padrão interno que calibra o tamanho da amostra - aos poços que contêm a escada e as amostras.

Insira o microchip em um analisador de fragmentos para executar o chip. Uma vez dentro, a tensão aplicada gera forças eletroforéticas, conduzindo a amostra do poço para o microcanal de carregamento de amostras, de onde atinge a interseção cruzada entre esse canal e o canal de separação. A corrente elétrica ajuda a amostra a entrar no microcanal de separação.

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