O ensaio de captura de partículas semelhantes a vírus: um método para isolar VLPs exibindo antígenos de uma amostra usando esferas magnéticas conjugadas com anticorpos neutralizantes

Anticorpos neutralizantes, ou NAbs, são secretados pelas células para protegê-las contra vírus invasores.

Para estudar as interações de NAbs com vírus, use partículas semelhantes a vírus projetadas, ou VLPs. Essas estruturas nanométricas contêm um conjunto de proteínas derivadas de vírus sem material genético viral, tornando-as não infecciosas. As VLPs são circundadas por uma bicamada lipídica embebida com glicoproteínas de envelope antigênico, que apresentam um epítopo neutralizante, uma região especializada à qual os NAbs se ligam.

Adicione as VLPs a um tubo contendo anticorpos neutralizantes ligados a esferas magnéticas conjugadas com proteínas. Incube sob agitação para evitar que as esferas se assentem. Durante a incubação, a região do epítopo das VLPs reconhece o parátopo complementar na região Fab dos NAbs, resultando em complexos antígeno-anticorpo. Isso, por sua vez, ajuda as esferas magnéticas a capturar os VLPs.

Coloque o tubo em um rack de separação equipado com um ímã forte. Sob a influência de um campo magnético, as esferas complexadas com VLPs se movem em direção ao ímã sem perturbar a interação antígeno-anticorpo. Esta etapa captura os VLPs ligados, enquanto aqueles