Ensaio de coloração nuclear diferencial: um ensaio para determinar a citotoxicidade mitocana por iodeto de propídio e coloração dupla de Hoechst

0 visualizações • 4:31 min. • July 8th, 2025

Os mitocanos são uma classe de medicamentos que afetam seletivamente o funcionamento das mitocôndrias nas células cancerígenas e induzem a apoptose.

Para determinar a citotoxicidade mitocana, semeie uma suspensão celular contendo células cancerígenas semi-aderentes em uma placa de vários poços. Trate a placa com a solução mitocan desejada e incuba.

O mitocano entra na célula cancerosa para interromper sua atividade mitocondrial, levando à morte celular em células cancerígenas sensíveis ao mitocano. Tratar as células com uma solução de coloração contendo uma mistura de corante Hoechst e iodeto de propídio.

Hoechst, um corante fluorescente permeável à membrana, penetra em todas as células e se liga à região rica em AT de seu DNA, conferindo uma fluorescência azul aos núcleos de células vivas e mortas.

Em contraste, o iodeto de propídio, um corante fluorescente impermeável à membrana, entra exclusivamente nas células mortas através das porções danificadas de suas membranas. O corante se intercala entre as bases do DNA, conferindo uma fluorescência vermelha adicional às células mortas. A presença de ambos os corantes nos núcleos dessas células faz com que as células mortas pareçam roxa

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Corante Hoechst