Ensaio de hemólise: um método in vitro para medir a lise induzida por ionóforo de cálcio em eritrócitos humanos

A hemólise é a ruptura dos eritrócitos para liberar seu conteúdo celular no espaço circundante.

Para testar a hemólise, comece com um tubo contendo eritrócitos em solução isotônica sem glicose, contendo eletrólitos, em relação aos fluidos corporais. Essa solução mantém os eritrócitos intactos e a ausência de glicose induz estresse celular. Isso ativa os canais catiônicos, permitindo a entrada de íons de cálcio no espaço citosólico da célula.

Adicione uma solução contendo uma concentração ideal de íons de cálcio que se ligue aos íons de cálcio e facilite seu transporte para o citosol, causando uma sobrecarga de íons de cálcio dentro dos eritrócitos.

Esse influxo ativa scramblase, uma proteína que transloca os fosfolipídios entre as monocamadas lipídicas da membrana plasmática, interrompendo sua assimetria. Esse fenômeno também transloca a fosfatidilserina, um fosfolipídio de monocamada interna, para a monocamada externa, um indicador de eriptose - morte programada de eritrócitos.

Um aumento nos íons de cálcio citosólico ativa os canais de potássio e expulsa os íons de potássio da célula. Um desequilíbrio osmótico leva à perda de água e ao encolhimento do eritrócito. Uma exposição ma