Medindo a contração do SMC in vitro: um método não invasivo para avaliar a contração das células musculares lisas usando detecção de impedância de substrato de célula elétrica

A parede da aorta possui predominantemente células musculares lisas, ou SMCs, contendo maquinário de proteínas contráteis que se contraem e relaxam para regular o fluxo sanguíneo aórtico.

Para medir a resposta contrátil de SMCs aórticos in vitro, obtenha uma placa de vários poços contendo uma matriz de sensores de detecção de impedância de substrato de célula elétrica, ou ECIS. Cada matriz contém eletrodos de filme de ouro no fundo do poço, delineados com um filme isolante. Cubra os poços com gelatina.

Semeie a suspensão SMC humana primária nos poços. Transfira a placa de poço contendo ECIS para um suporte de placa conectado a um amplificador e sistema de aquisição de dados, garantindo o contato do eletrodo com o suporte. Aplique uma pequena corrente alternada constante entre os eletrodos para medir o potencial entre eles.

Durante a incubação, os SMCs aderem e se espalham no revestimento de gelatina. As células se comportam como isolantes, limitando o fluxo de corrente entre os eletrodos. À medida que mais células se ligam à superfície, o fluxo de corrente diminui ainda mais. Como resultado, a impedância, ou oposição ao fluxo de corrente, e o potencial aumentam. Eventualmente, as c