Ensaio de Liberação de Enzima Mediadora Humanizada: Um Método Imunoquímico para Rastrear o Potencial Alérgico do Antígeno de Teste Monitorando a Resposta de Degranulação de Basófilos In Vitro

Quando expostas a um alérgeno - antígeno não patogênico - as células apresentadoras de antígeno processam e apresentam o alérgeno aos linfócitos T auxiliares do tipo 2. Esses linfócitos T desencadeiam os linfócitos B para se diferenciarem em plasmócitos e produzirem anticorpos imunoglobulina E, IgE, que se ligam a receptores Fc específicos de IgE de alta afinidade na superfície dos basófilos circulantes - células secretoras contendo grânulos.

Após a exposição subsequente ao alérgeno, os complexos IgE-Fc reconhecem e se reticulam com o alérgeno, ativando basófilos para liberar grânulos que compreendem mediadores como citocinas e enzimas lisossômicas, incluindo β-hexosaminidase, evocando uma potente resposta inflamatória.

Para rastrear o potencial alérgico de um antígeno de teste in vitro, comece com uma suspensão de basófilos cancerosos de rato transduzidos expressando receptores Fc específicos de IgE humana. Trate com soro humano contendo IgE de um doador alérgico. Os anticorpos IgE se ligam e sensibilizam os receptores Fc basófilos.

Em seguida, adicione tampão e um volume adequado de antígeno de teste aos basófilos sensibilizados. O antígeno, dependendo de sua afinidade por IgE li