Ensaio de Eferocitose de Células Fixas: Um Método para Estudar a Captação Eferocítica de Células Apoptóticas por Macrófagos Usando Microscopia de Fluorescência

As células submetidas à apoptose - morte celular programada - exibem sinais de coma-me em sua superfície celular, facilitando a degradação por fagócitos - células imunes especializadas. Esse processo de depuração das células apoptóticas é chamado de eferocitose.

Para realizar o ensaio de eferocitose, primeiro tome uma suspensão de células apoptóticas de dupla coloração. As superfícies dessas células são marcadas com biotina, e o citoplasma é marcado com um corante de rastreamento celular, marcando materiais derivados de células apoptóticas.

Adicione a suspensão celular a uma cultura de células de macrófagos aderidas, que funcionam como eferócitos. Centrifugar, forçando o contato entre macrófagos e células apoptóticas, e incubar.

Os receptores eferocíticos nos macrófagos se ligam à fosfatidilserina - um sinal de coma-me - na membrana celular apoptótica, facilitando seu engolfamento. Pequenos fragmentos da célula apoptótica são absorvidos dentro de uma vesícula ligada à membrana, chamada eferrossomo.

Isso resulta em uma fração eferocitada - parte da célula apoptótica dentro do macrófago - e uma fração não eferocitada - a parte não internalizada da célula apoptótica.

Adicione estrepta