Ensaio de cinética de sobrevivência baseado em impedância celular para avaliar a sobrevivência do vírus

Os vírus se ligam ao receptor da célula hospedeira e se internalizam em um endossomo. A membrana endossômica se funde com a membrana viral, liberando conteúdo viral dentro da célula.

Ao atingir o núcleo, o genoma viral se transcreve em mRNA e depois se traduz para formar proteínas virais. Os componentes virais entram no citoplasma e se reúnem em vírions, que se retiram da célula e causam efeitos citopáticos – mudanças na morfologia da célula hospedeira e morte.

Para avaliar a cinética de sobrevivência do vírus medindo a impedância da célula hospedeira, pegue uma placa multipoços revestida com microeletrodos de medição de impedância em sua parte inferior. Adicione uma suspensão de célula hospedeira aos poços e incube para permitir que as células adiram à superfície do eletrodo e cresçam.

Em seguida, tome suspensões virais pré-tratadas com solução salina com diferentes cargas virais. O tratamento com solução salina fornece cloreto ao vírus, que produz ácido hipocloroso que o mata – reduzindo a infectividade viral. Adicione essas suspensões virais em seus respectivos poços.

Meça a impedância celular - um fenômeno de oposição ao fluxo de corrente elétrica através dos eletrodos - pelas