Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 3:52 min. • July 8th, 2025
Os estrogênios são hormônios esteróides que atuam como moléculas de sinalização endócrina e se ligam a receptores nucleares - receptores de estrogênio beta, formando complexos de receptores de estrogênio-beta.
Esses complexos ligante-receptor dimerizam e formam homodímeros no citoplasma celular. O homodímero resultante entra no núcleo, liga-se ao elemento de resposta ao estrogênio, ERE - uma sequência de DNA específica dentro do promotor do gene alvo - e inicia a transcrição.
Para determinar a atividade estrogênica dos fitoestrogênios - metabólitos secundários derivados de plantas que imitam a função do estrogênio - comece com uma placa de vários poços contendo células repórter suspensas em um meio apropriado.
As células repórter são projetadas para superexpressar os receptores de estrogênio beta e transfectadas com um gene de luciferase fundido ao promotor ERE. Adicione a solução de amostra contendo fitoestrogênios e incuba.
Durante a incubação, o fitoestrogênio se liga aos receptores de estrogênio, beta - expressos nas células repórteres. Uma vez ligados, os complexos receptores de fitoestrogênio dimerizam e se translocam para o núcleo.
Dentro do núcleo, o complexo dimerizado se
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